莖尖培養

蘭花莖尖培養多從生長的植株上切取3～20毫米的莖， 去掉苞片， 用水沖洗乾淨後， 放入75％酒精中浸泡數秒， 取出， 轉入加有吐溫-20的漂白粉清液中浸泡約10分鐘， 再用無菌水沖洗2～3次， 置消毒濾紙中吸幹水分。 然後在無菌條件下， 用解剖刀將外表的幼葉剝掉， 切取0．5～0．8毫米大小的芽， 接種在固體培養基上， 保持室溫23～24C， 並給予1500～2000勒克斯、每天12～14小時的光照， 誘導原球莖發生。 常用的培養基為MS和BS培養基。 培養基中一般不使用2， 4-二氯苯氧乙酸（2， 4-D）， 而常加人10％的椰子汁（CM）、帶乙酸（NAA）0．5～1．0毫克／升和6-苄基嘌呤（BA）0．1～1．0毫克／升。 有條件的單位， 應儘量使用液體振盪培養， 水準振盪可快些， 而立體振盪應慢些， 一般每分鐘2次即可。 若無振盪設備， 可手動每天振盪2～3次。 振盪不僅有利於原球莖球狀體形成， 也有沖洗周圍組織的作用， 防止組織的老化與枯死。 通常在接種後不久， 生長點組織先呈綠色， 接著生長莖葉， 以後在生長點基部的組織開始肥大， 形成原球莖。 原球莖可以不斷分割繼代培養， 加速繁殖， 直至達到所需的個數為止， 然後再轉入分化培養。 此時培養基中離子濃度應調低些， 約15～20毫克／升較好， 或在分化培養基中加人椰子汁等天然物質， 原球莖便會很快再生成植株。 而再分化的個體必須移人大的培養器內， 繼續培養3～6個月， 直至小苗有3～4片葉、3～4條根、高3～10釐米時才能移出， 並將根部瓊脂清洗乾淨後， 栽入泥炭或蛭石中， 但要注意保濕和弱光， 並定期澆水施肥， 促進生長。