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新幾內亞鳳仙的組織培養

鳳仙是鳳仙花科鳳仙花屬多年生常綠草本植物。 新幾內亞鳳仙是鳳仙花家族中的一個新品種。 它花色豐富, 四季開花, 花期長, 葉色獨具特色, 作為周年供應的時尚盆花, 日益受到了人們的青睞。 它的傳統繁殖方法是通過播種繁殖, 但播種繁殖需要恒定的溫度, 而且種子價格比較昂貴, 發芽率低。 近年來, 用無性繁殖, 利用組織培養技術, 既可以在短期內取得大量的優質脫毒苗, 又可避免因常規無性繁殖而導致的種性退化。 具體可用新幾內亞鳳仙的莖段作為外植體,

對其進行離體快速繁殖。

材料與方法

試材處理

從新幾內亞鳳仙植株上剪取帶有腋芽的嫩梢, 去掉葉, 先用自來水沖洗10分鐘, 再用洗潔劑溶液洗滌1-2次。 在無菌條件下, 依次用70%的酒精浸泡30秒鐘, 2%的次氯酸鈉浸泡12分鐘, 無菌水沖洗3-5次。 最後將處理好的嫩梢切成每個節間約0.5cm長的帶芽莖段接種在預製好的初代培養基上。

培養條件

分化培養基的選擇 以MS作為基本培養基, 分別設置BA0.5、1.0、1.5、2.0 mg /L,NAA0.2、0.4、0.6、0.8mg/L各4種濃度, 共16個組合。 篩選分化培養基中BA和NAA最佳組合, 3次重複。 各培養基組合均加入蔗糖3%-4%, 瓊脂6-8g, Ad30mg/L, 調PH值為5.8。

生根培養基的選擇 以MS為基本培養基, 設置IBA0.3、0.6、0.9、1.2、1.5mg/L5種濃度, 摸索最佳生根條件。 各培養基均加入蔗糖2%-2.5%, 瓊脂6-8g, 調PH值為5.8。

繼代培養

新接的外植體約30天萌發成苗,

苗高2-3cm時, 將小苗剪成0.5cm長帶芽莖段, 放入分化培養基中繼代培養。

生根培養

小苗高3cm左右時, 從基部剪下, 接種於生根培養基上, 進行生根培養。

小苗移栽

小苗生根培養根長達2cm時, 進行移栽, 先移入溫室中煉苗1-2天, 溫室中培養2-3周後上盆。

結果與分析

不同濃度的BA和NAA組合對新幾內亞鳳仙分化出苗的影響

以MS作基本培養基, 4種濃度BA和4種濃度NAA組合, 對新幾內亞鳳仙出苗影響見表1。

結果表明:芽的增殖和嫩梢的增長不僅取決於BA、NAA的絕對數量, 而且取決於二者相對比例。 濃度最大BA/NAA條件下, 繁殖係數17達最大, 而且嫩梢生長度也達到最大1.23, 濃度最小BA/NAA條件下, 繁殖係數、嫩梢長度之比為10/0.67, 二者絕對值處於中間狀態。 綜合芽的形成和嫩梢生長兩種情況看:高濃度的BA(1.5-2.0mg/L)與NAA配合時,

嫩梢生長較正常, 平均株高1.09cm, 增殖倍數為14, 較低濃度的BA(0.5-1.0mg/L)與NAA配合時, 繁殖係數為8.9, 平均株高為0.68cm, 長勢不良, 實驗條件下以BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L效果為最佳。

不同濃度的IBA對生根的影響

以MS為基本培養基, 5種濃度IBA條件下生根效果見表2。

結果表明:開始生根天數隨IBA濃度加大而縮短, IBA濃度從0.3-0.9mg/L範圍內, 隨濃度加大, 生根率、每株根數增加, 超過0.9mg/L, 生根率下降。 且多形成粗大根, 產生愈傷組織或從愈傷組織上再生根。 實驗條件下, 以0.9mg/L生根效果最好, 生根較快, 根系生長正常, 根數較多。

小苗移栽

已生根小苗經20天, 待根長達2cm時, 取出試管苗, 洗去根上瓊脂, 移至透水通氣的蛭石中, 先在培養室中溫度20℃-25℃, 相對濕度65%-75%條件下培養2-3周, 然後移至散射自然光下煉苗1-2周,

最後上盆進入溫室, 成活率可達95%以上。 這期間除了注意保溫保濕外, 土壤濕度不宜太大, 溫度以23℃-25℃為好, 注意採用殺菌劑保護, 避免幼苗腐爛死亡。

結 論

MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+Ad30g/L+蔗糖3%+瓊脂8g/L,調PH值為5.8是新幾內亞鳳仙莖段培養較為理想培養基。 繼代培養天數約為30天左右, 繁殖係數可達17, 嫩梢生長正常。

在MS+IBA0.9mg/L+蔗糖2.2%+瓊脂7g/L, 調PH值為5.8的培養基上, 新幾內亞鳳仙試管苗生根效果較好, 生根率可達95.4%, 根系發達, 植株生長旺盛。

生根兩周後的試管苗尚需煉苗2-3天, 經培養室移植培養2-3周, 自然光下1-2周煉苗可上盆入溫室, 成活率達95%以上, 小苗成活關鍵是基質選擇及溫、濕度控制。
 

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