20世紀70年代以來, 科研院所已在蘭科植物中採用生物工程技術繁殖蘭花, 其效果是傳統方法無法媲美的。 筆者嘗試在家庭環境裡開展此項工作, 已獲得小批量的春蘭試管苗。 現將具體做法介紹如下, 供蘭友們參考。
①建立小型家庭組織培養室, 自製設備, 簡易土法上馬。 眾所周知該項工作要在無菌條件下進行。 為此, 必須研製密封良好的玻璃接種箱、淨化空氣裝置, 採取種種技術措施, 以降低轉瓶污染率。 用酒精噴霧降塵, 成功率上升為92%, 這就給篩選最佳培養基配方贏得時間,
②在家庭環境裡如何才能做到無菌操作呢?筆者著重從以下幾個方面入手:
所有接觸培養基、能耐高溫的器皿用幹熱法(140~150℃)處理, 對不耐高溫的用具採用化學方法滅菌消毒。
為解決接種時需在火焰上進行的問題(因箱內幾乎無空氣), 增添了一隻30瓦的電爐, 但因溫度高易灼壞外植體, 故又加設了通風降溫的設施。
為了減少刀具第二次在環流中污染, 高溫湧毒後安放在一端封閉的筒內, 同時不斷鼓入淨化的空氣加以冷卻, 確保外植體安然無恙地進入營養基瓶中。
所有進入箱內的物品均需酒精消毒後才放進, 凡是帶菌者不許人箱。 箱體消毒程式是酒精噴露後紫外線消毒, 並定期用甲醛加高錳酸鉀進行薰蒸……
③選用適宜的培養基四方。 誘導一分化一生根均採用MS基加萘乙酸、細胞分裂素。 但不同的生長階段還需做成分上的調整, 特別是生根時由於蘭生根較其他品種花卉難些, 故採用高濃度的NAA浸泡數秒的做法, 效果良好。
④外值體的採取、消毒。 外植體以長根的幼苗(未展開葉), 隨采隨接種最好, 成活率較高(接種時節以10月至次年2月最好)。 外植體消毒, 筆者採取0.1升汞加0.l%濃鹽酸多次消毒的辦法, 效果更佳。
⑤培養環境。 光照1000~2000勒, 10~16小時, 培養濕度26℃土2℃, 空氣濕度應控制在較低的水準(70%~80%), 否則極易再一次污染。
幾點體會:
①在家庭中建立小型組培宜是可行的, 它的投資少(可充分利用家中的條件)。 筆者從籌備到進行試驗只花去數百元,
②無菌操作必須從思想上重視, 操作上謹慎才是。 否則損兵折將, 後果不堪設想。
③目前因手邊無實體顯微鏡, 只能做以芽生芽的試驗。 採取一些措施如分期切制樣品、液體加旋轉床的方案, 是取得大批量類原球莖的一種途徑, 其繁殖速度也會有所突破。