實驗室檢查診斷鱉病

檢查的目的是具體瞭解疾病的病症， 查明病原， 為確診打下基礎。 檢查分鱉體檢查、剖檢和實驗室檢查。 以下介紹實驗室檢查。 實驗室檢查的工作主要包括鏡檢、病毒分離、細菌培養、生化試驗、電鏡觀察等。  

1．鏡檢：在整個實驗室檢查中隨時會用到鏡檢， 但第一步鏡檢的目的是為了檢查有無寄生蟲存在。 用玻片壓展法製片， 部位是體表和內臟器官的黏液、病灶、血液， 然後在顯微鏡下觀察。

2．病毒分離：病毒檢查的方法很多， 這裡介紹一種比較簡單取病鱉的腦、肝、脾、腎、膽等內臟器官用滅菌生理鹽水洗2～3次後，

剪碎， 勻漿機勻漿， 加入含200單位（微克）/毫升青黴素、鏈黴素的雙抗HanK''s液， 製成10％～20％的組織懸液， 再以2000轉/分鐘離心10～20分鐘， 吸取上清液分別接種于已長成單層的FHM、EPC或其它傳代細胞， 置培養箱中37℃下培養。 7天后將接毒的培養細胞凍融1次， 吸取該細胞凍融液1毫升盲傳於另一瓶正常傳代細胞中， 為盲傳一代， 依此盲傳3～4代後， 將病毒的細胞培養物在銅網上吸附， 用2％磷鎢酸負染， 電鏡下觀察病毒顆粒。 與此同時進行病毒核酸類型的鑒定、耐酸性試驗和乙醚抵抗性試驗等理化特性檢驗， 對病毒進行綜合鑒定。

如果你僅僅想知道疾病是否由病毒引起， 而無需瞭解是哪一種病毒時， 有一種方法更簡單方便：取病鱉的肝、腎、脾等組織，

用滅菌生理鹽水沖洗2～3次後， 剪碎研磨成組織懸液， 加入青黴素、鏈黴素各1000國際單位/毫升， 作用一段時間後， 離心取上清液， 按每只0.2毫升的量注射于健康小甲魚， 飼養一段時間後， 觀察有無病症出現， 可確定該疾病是否由病毒引起。

3．細菌分離：無菌操作取病鱉體表病灶和內部器官的病變組織， 用接種環反復插入後， 劃線接種于營養瓊脂平皿， 放入30℃恒溫箱中培養24小時後， 觀察各菌落形態， 並挑取各菌落塗片， 經革蘭氏染色後顯微鏡下觀察細菌形態。 同時， 挑取各菌落分別劃線于營養瓊脂平皿、新鮮雞血瓊脂平皿， 置於30℃下進行純化， 培養24小時後， 再塗片， 進行革蘭氏染色和鞭毛染色， 顯微鏡下觀察細菌形態結構。 有條件的地方，

可取細菌培養物銅網上制膜， 2％磷鎢酸（pH值7.0）負染後， 電鏡下觀察細菌的細微結構。

然後， 將各菌株進行各種生理生化試驗， 確定其生長適溫、各種理化特性。

最後， 根據其細菌菌落顏色、大小、有無溶血現象以及菌株的形態、大小、生長適溫和各種理化特性， 參考《一般細菌常用鑒定方法》、《伯傑氏細菌鑒定手冊》、《動物微生物學》、《水產動物疾病學》等書籍資料， 確定病原菌的名稱。 有條件的地方， 最好加一步動物感染試驗和鱉的感染試驗， 確定幾種菌株中， 哪一種或幾種是主要致病菌。