百靈鳥以能歌善舞而文明於世， 但是雌雄百靈之間也存在較大的差別。 一般來說， 雌百靈鳥就只能單聲鳴叫， 叫不出婉轉動聽的歌聲。 而且從外形上來看， 雄百靈鳥顯得漂亮、精神， 羽毛的顏色比雌鳥豔麗有光澤。 而我們可以根據百靈鳥形態、鳴叫聲等細微的差別來準確的鑒別出它的性別。
雌鳥頭小， 無後腦勺， 近嘴處窄；雄鳥頭大， 有後腦勺， 近嘴處寬。 雄鳥眼大有神， 眼在嘴上邊， 兩眼離嘴角較近；雌鳥眼小無神、發呆， 眼和嘴在一條直線上， 兩眼離嘴角較遠。
雄百靈鳥眼眉白， 寬而長， 眉清而秀， 腿粗壯而長， 嘴長而粗， 啄食有力， 每個翅膀的飛羽中有6-12枚白色羽毛， 這幾枚飛羽潔白而又有光澤。 雄鳥的“黑頸圈”呈半圓形， 羽毛光澤透亮。
雌百靈鳥眉粗短不秀， 眉色不鮮明， 有的眉中間有間斷， 腿細短不粗壯， 嘴短而細， 啄食比雄鳥軟弱， 每個翅膀的飛羽中的白色羽毛不足6枚，
在辨認百靈鳥性別的時候除了對比觀察之外， 還應該用手觸摸。 因為， 在你觸摸鳥兒的時候， 會明顯感覺它們身體骨骼成長的區別。 一般來說， 把雛鳥攥在手裡模一模， 雄鳥骨質發硬， 雌鳥則比較軟綿綿的。 此外， 雄鳥頭頂中央從前至後有隆起的一個高棱， 而雌鳥則比較扁平。
如果你是一個非常有經驗的鳥類飼養者， 你可以通過百靈鳥的鳴叫聲來判斷它們的性別。 簡單的說， 雄百靈鳥鳴叫聲清脆明亮， 聲音悠揚婉轉。 而雌性百靈鳥的叫聲則比較的單一， 比雄鳥的聲音略顯得無力， 暗淡， 沒有那種清脆透亮的感覺。
