一、細針抽吸(fine-needle aspiration, FNA)
細針抽吸主要運用在懷疑有腫瘤疾病的小動物身上。 尤其是對多發的腫塊和淋巴性疾病。 細針抽吸的主要過程:用長度合適的細針(23至25號針頭)抽取腫塊內的單一細胞懸液。 針頭可與10或者是20毫升的注射器相連, 注射器要求乾燥無菌。 通過細針抽吸可採取通過FNA可採集多部位的組織樣本, 包括皮膚和皮下組織、深部或淺表淋巴結、脾、肝、腎、肺、甲狀腺、前列腺以及腹腔內來源不明的腫塊(如縱隔腫塊)。 如果抽取淺表部位, 抽取部位無需消毒, 如果抽取內部的器官, 抽取部位需要經過剪毛消毒。
細針抽吸圖示
將帶針頭的注射器刺入腫物內, 連續抽吸3-4次, 恢復到原位。 拔出注射器, 一般情況下, 注射器內看不見所采的組織樣品, 僅針頭內的就可以滿足需要, 可以塗抹3-4張品質優良的片子。 將採取的組織製作好以後, 進行染色, 一般為diff-quick染色。 細針抽吸可以診斷個別的腫瘤性疾病如肥大細胞瘤。
A液作用為固定載玻片上面的樣品, B液為紅色染嗜酸性細胞, C液為藍色, 使嗜鹼性細胞著色。 A液染色時間為10-20秒, B液為5-10秒,
二、皮膚組織活檢
皮膚病變診斷的具有說服意義的方法。 分為打孔組織活檢和切除活檢。 組織活檢應結合病史, 動物種類, 臨床症狀, 活檢取出樣品的位置, 用藥史等資訊結合起來才具有重要意義。
1.打孔活檢
圖一打孔活檢示意圖
圖二為組織活檢打孔器
組織活檢打孔器分為3mm, 4mm和6mm, 8mm。 3mm和4mm孔徑用於鼻鏡和腳墊的活檢。 6mm和8mm孔徑可用於皮膚和其他組織的活檢。
組織活檢具體過程:將活檢針放置到活檢部位上, 在按壓作用力下順時針旋轉活檢針切入皮膚。 切頭全層皮膚後用鑷子輕輕夾住活檢皮膚組織, 提起後使用手術刀或者是手術剪剪短皮下組織。 迅速將切下的皮膚組織樣本放入福馬林保存液中, 採樣後皮膚為一橢圓型空洞, 可以讓其自己癒合或者縫合一針。 在皮膚病變和正常部位交界處採取樣品。 如果病變大面積, 需要在多個部位採取樣品。 如果是在動物敏感部位採樣, 可進行全身鎮靜或者局部麻醉。
2.切除活檢
就是腫物切除後採取組織進行病理檢查。
三、微生物的培養
真菌的培養
DTM/ESA廯菌培養基
該培養基分為兩部分,為不同的培養基。
DTM廯菌快速培養基。顏色較淺,偏橙色。透明,其中含有抗生素成分,可最大程度的抑制黴菌和污染菌的生長。廯菌生長後培養基變紅。ESA促分生孢子培養基,顏色較深,偏土黃色,不透明。可最大限度抑制黴菌和污染菌的細菌生長,並可更容易讓廯菌產生大分生孢子用於鑒別。廯菌生長後培養基變為藍綠色。可能會出現假陽性的結果。出現陽性結果後,需要注意廯菌菌落的生長類型,判斷可能的感染來源。結合染色(可只使用diff-quick染液的c液)在顯微鏡下觀察判斷大分生孢子類型。
顯微鏡下的大小孢子菌
該培養基分為兩部分,為不同的培養基。
DTM廯菌快速培養基。顏色較淺,偏橙色。透明,其中含有抗生素成分,可最大程度的抑制黴菌和污染菌的生長。廯菌生長後培養基變紅。ESA促分生孢子培養基,顏色較深,偏土黃色,不透明。可最大限度抑制黴菌和污染菌的細菌生長,並可更容易讓廯菌產生大分生孢子用於鑒別。廯菌生長後培養基變為藍綠色。可能會出現假陽性的結果。出現陽性結果後,需要注意廯菌菌落的生長類型,判斷可能的感染來源。結合染色(可只使用diff-quick染液的c液)在顯微鏡下觀察判斷大分生孢子類型。
顯微鏡下的大小孢子菌