蜘蛛的天敵很多。 蟾蜍、蛙、蜥蜴、蜈蚣、蜜蜂、鳥類都捕食蜘蛛, 有的寄生蜂寄生於蜘蛛卵內, 有的寄生蠅的幼蟲在蜘蛛卵袋中發育, 小頭蚊虻昆蟲幾乎全部都是以幼蟲的形式寄生到蜘蛛體內。 蜘蛛常用多種方法來禦敵, 如排出毒液, 隱匿, 偽袋, 擬態, 維護色, 振動等等。 當逃不掉時, 而自己的附肢被敵害夾持時, 乾脆切斷自己的附肢一走了之, 反正自斷的步足在蛻皮時還會再生。
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